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教您檢測(cè)大鼠甲狀腺激素(TT4)elisa試劑盒

更新時(shí)間:2017-05-11      瀏覽次數(shù):1290

大鼠甲狀腺激素(TT4)elisa試劑盒基本信息  

 甲狀腺激素是甲狀腺所分泌的激素。 英文名稱:thyroxin(e) 別名:干甲狀腺 ,甲狀腺粉 分子式:C15H11O4I4N 相對(duì)分子質(zhì)量:776.93。 物理性質(zhì):白色針狀晶體。無(wú)臭。無(wú)味。遇光變質(zhì)。熔點(diǎn)231-233℃(分解)。不溶于水和乙醇等普通有機(jī)溶劑。溶于含有無(wú)機(jī)酸或堿的乙醇,也溶于氫氧化堿和碳酸堿溶液。在其酸性乙醇溶液中加入亞硝酸鈉,加熱即呈黃色,再加過(guò)量氨水即變?yōu)榉奂t色。 化學(xué)本質(zhì):甲狀腺素即為T4,為四碘甲狀腺原氨酸。 制?。嚎捎膳!⒀?、豬等的甲狀腺中提取,或由人工合成。

檢測(cè)大鼠甲狀腺激素(TT4)elisa試劑盒用到的試劑方法

1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。

  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。

  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。

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